引物长度一般为18-22，根据不同的实验，长度也没有什么限制。上下游引物的Tm值越接近越好，最好不超过1，但大小没什么限制。根据不同引物的长度，Tm值差距挺大的。一般情况，GC含量为45%-50%，但现在的很多酶的活性很好，这一条不需要考虑太多。后面是发卡结构和自身形成环的参数，可看可不看，影响不大。
钩端螺旋体对热抵抗力弱，60℃ 1分钟即死亡。在湿土或水中可存活数月，这在传播上有重要意义。0.2%来苏、1∶2000升汞、1%石炭酸经10～30分钟可杀灭钩端螺旋体。钩端螺旋体的抗生素敏感性测定尚无标准化的试验方法。但经临床对比试验认为多西环素和青霉素具有很好的疗效。动物体内敏感性试验结果显示，钩端螺旋体对多种抗菌药物敏感。
质谱（mass spectrometry，MS）是一种通过测定带电离子质量/电荷比（m/z，简称质荷比）而进行定性、定量检测的一种现代分析技术。质谱技术最初用于放射性核素、无机元素，以及小分子有机物质的检测。20世纪80年代，电喷雾电离（electrospray ionization，ESI）与基质辅助激光解吸电离（matrixassisted laser desorption ionization，MALDI）两种“软电离”技术的发明，解决了蛋白质、多肽等热不稳定的大分子物质的电离和质谱检测难题，质谱技术从此进入了生命科学领域。微生物的质谱鉴定是一种基于细菌全细胞蛋白...
数值分类法是与计算机技术相结合而发展起来的细菌分类方法。它对细菌的各种生物学性状按“等重要原则”，选用50项以上的生理、生化指标逐一进行比较，通过计算机分析各菌间相似度，划分细菌的属和种。数值分类法的优越性在于其以大量的细菌分类特征为基础，相对于传统分类法更为客观、稳定，且能为细菌的鉴定积累大量资料。然而，数值分类法并不能真正反映细菌之间的亲缘关系，因此，在细菌类群进行定种或定属时，通常以基因组DNA（G + C）mol%含量和基因组DNA杂交进行进一步的确证。数值分类法最典型的成就是美国疾病预防控制中心针对临床病原菌建立的CDC分类法。但是，随着化学分类法、遗传学分类...
遗传学分类法是以细菌的核酸、蛋白质等大分子物质的同源程度进行分类的方法。遗传学分类法的优点主要有：①有利于了解细菌的进化和原始亲缘关系，加深入们对于细菌的整体认识；②对细菌的“种”有一个较为一致的概念；③使细菌分类不会再出现经常性或根本性的变化；④有利于制定可靠的细菌鉴定方案。目前，细菌分类学研究正发展成为以核糖体RNA基因编目法、基因组DNA杂交等遗传学分类法为主要依据，兼顾细菌的生理生化特征、细胞的化学组分等多种信息，综合确定菌株的分类地位，即多相分类学。
菌体短小，常呈V字形或成对排列，偶呈丝状。有鞭毛、无芽胞，一般不形成荚膜。幼龄菌呈革兰阳性，其陈旧培养物多转为革兰阴性。需氧或兼性厌氧，营养要求不高。在血琼脂平板上形成小而透明的S型菌落，有狭窄的β溶血环。在半固体培养基上出现倒伞形生长。
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