工作菌种的传代次数应严格控制，《中国药典》2010版规定，所用标准菌种的传代次数不得超过5代，防止过度的传代造成菌种变异。 从菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为0代，冷冻干燥的原始菌种开启后转种为第1代，直至到第3代为工作菌种。即可应用生产。

厌氧菌是指无氧或氧化还原电势低的条件下才能生长繁殖的一类细菌。根据对氧的敏感程度，广义的厌氧菌可分为专性厌氧菌、微需氧菌和耐氧菌。习惯上厌氧菌是指专性厌氧菌，即必须在大幅度降低氧分压的条件下才能生长，可分为兼性厌氧菌、微需氧菌和专性厌氧菌。临床上所谓的厌氧菌肺炎主要指专性厌氧菌所致的肺部感染。专性厌氧菌只能在无氧或低于正常大气氧分压的条件下才能生存或生长，进一步可分为极端厌氧菌、中度厌氧菌和耐氧厌氧菌。 一、极端厌氧菌 这类厌氧菌对氧极端敏感，在0.5%的氧浓度下，或在空气中暴露不到10min 即死亡。因在临床实验室极难分离到，目前尚不知其致病情况。 二、中度厌氧...

16S rRNA靶基因的DNA测序应用于菌种鉴定，依赖于迅速发展的互联网技术、计算机技术与分子生物学相结合而诞生的生物信息技术。世界范围内生物信息资源的交流、共享及在线核酸分析程序的开发，为细菌16S rRNA靶基因测序鉴定奠定了基础。目前，几乎全部原核生物的16S rRNA基因序列已测序成功并保存在公共核酸库中，且对于所有新命名的细菌，亦必须测序其16S rRNA基因并提交到公共核酸库中。因此，对于未知的细菌，只需要采用针对16S rRNA基因保守区的通用引物进行扩增和测序，再通过公共的核酸库进行核酸序列的Blast分析，即可快速判定该细菌归于哪个属甚至哪个种，以及它...

细菌的rRNA有5S、16S及23S三种，其中16S rRNA基因的编码序列常用于细菌的分类学研究。16S rRNA基因用于细菌的分类研究的优势有：①存在于所有的原核生物中，功能同源且最为古老，素有“细菌化石”之称；②分子量约1540核苷酸，大小适中、易于操作；③由不连续保守区和可变区组成，其保守区可用于通用引物设计，可变区可推测其分类学地位。

不需要，产气荚膜梭菌虽属厌氧性细菌，但对厌氧程度要求并不太严格，按照一般菌株冻存方法进行冻存即可。

不一定。传代超过五代只是存在菌种变异可能，但如果传代到第六代、第七代……，经过形态、生化特性、DNA特征等验证，性状保持稳定，那么这些五代后的菌还是可以正常使用。