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①两亲本菌株的选择和遗传标记的制作(选择不同的营养缺陷型,(A: [a+b-], B:[a-b+]) 对药物抗性差异)②原生质体的制备(高渗条件)③原生质体再生(测定再生率)④融合(PEG、离心沉淀、电脉冲等)⑤融合子的检出(直接检出法和间接检出法)⑥实用性菌株的筛选以上步骤的设备均可由一般实验室提供。因此一般实验室是能够进行的。

2022-07-07 01:27:18       huishouzhan

PCR 反应的五要素 1、引物 引物是 PCR 特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板 DNA 互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板 DNA 序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用 PCR 就可将模板 DNA 在体外大量扩增。 设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为 20bp 左右。②引物扩增跨度: 以 200-500bp 为宜,特定条件下可扩增长至 10kb 的片段。③引物碱基:G+C 含量以 40-60% 为宜,G+C 太少扩增效果不佳,G+C 过多易出现非特异条带。ATGC...

2022-07-06 08:12:36       zhimahu

一、菌名  Methanosarcina mazei二、分类地位1. 沿革─Archaea ;Methanosarcina mazei 在1936年由Barker发现,初命名为Methanococcus mazei。后来,第一个研究此细菌的法国细菌学家P.Maze,依其形状将菌名改为Methanosarcina mazei。2. 命名─ methano─甲烷。 Sarcina─八叠球菌。 三、自然栖息地   在烂泥、腐质土和ㄧ般草食性动物的排泄物上,均可找到其踪迹。另外,在盐水湖和污水中也可分离出此菌。四、大小型态   惟一独立、不规则的球菌。大小约1.0~3.0μm。...

2022-07-05 08:09:32       wshphd

提纯蛋白质后,需要测定其最小抑菌浓度(MIC),有文献提到根据MIC测得的结果计算抑菌率:抑菌率(%)= (阳性对照OD值—试验OD值) / (阳性对照OD值—阴性对照OD值 )X100样品的MIC与同性质药物和一些常用药物的MIC进行比较才有意义,不能单纯通过自己样品的结果就判断出高低,并且不能只用一种细菌。要考虑用不同种类的细菌进行实验,还要做质控。根据抑菌率大小可以判断是否具有抑菌能力。可参考以下药敏介绍:诸多药敏试验方法中,肉汤稀释法是标准方法,琼脂稀释法也可认为属于标准方法。其他任何方法必须与标准方法比较,才能确定可靠性。其他方法之间相互比较没有太大价值。比较...


多种病原微生物的同时检测或鉴定,是在同一PCR反应管中同时加上多种病原微生物的特异性引物,进行PCR扩增,这样就可以区分开来


13C、14C-UBT试验,又称呼气试验。幽门螺杆菌产尿素酶,可分解尿素为氨和CO2,CO2经血液循环后由肺呼出。患者口服稳定的放射性核素13C 或14C标记的尿素后,若存在幽门螺杆菌感染,则其呼气中会含有标记13C或14C的CO2,将呼气中CO2收集,利用红外光谱仪或质谱仪检测,即可诊断有无幽门螺杆菌感染。依据标记物不同可分为13C和14C呼气试验。此方法的优点:①无需侵入性内镜操作取标本;②放射性核素精密度高;③自动化程度高,操作简单;④可反映整个胃内情况,不受病灶分布影响;⑤标本检测不受空间和时间限制。缺点是14C具有放射性,对于儿童患者应选用13C呼气试验检测,...