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引物的OD数如何定量?
2022-07-01 03:11:58
huishouzhan
引物合成引物OD数是这样测定的:用紫外分光光度计,波长260nm,石英比色杯,光程为1厘米,测定溶液的光密度。测定时溶液的光密度最好稀释到0.2-1.0之间。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后,用1ml水稀释测OD值。需要根据稀释倍数换算出母液的OD值
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| 最后修改于 2022-07-01 03:27:08
引物纯化方式有哪些,如何选择?
2022-07-01 03:11:37
huishouzhan
◆ 脱盐寡核苷酸合成后,为了纯化寡核苷酸成为天然的DNA结构,首先必须去除保护基团。通过浓氨水处理,合成的寡核苷酸从固相载体上分离,2-氰乙氧基--磷酸二脂键的保护基团,以及碱基的保护基团基(苯甲酰基和异丁基)被去除,从而形成了天然的DNA结构。然而,必要的去保护步骤完成后,寡核苷酸混合物还包含几种必须被去除的小分子有机化合物。所有非必须有机化合物被移除的过程通常叫做脱盐。脱盐纯化可以借助反向硅胶柱进行。尽管脱盐纯化可以移除所有的非必须有机杂质,但它不能有效移除合成中产生微量的提前终止的寡核苷酸杂链。然而,脱盐的寡核苷酸还是能够满足PCR检测等基础生物研究。◆ BioR...
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| 最后修改于 2022-07-01 03:27:08
引物是如何合成的?
2022-07-01 03:11:01
huishouzhan
目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,而Bioneer自行研制的专利384并行高通量DNA合成仪,可实现99%的高合成率。无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主要差别在于合成产率的高低,试剂消耗量的不同和单个循环用时的多少。亚磷酰胺三酯法合成DNA片段,具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的,合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的,相邻的核苷酸通过3′→5′磷酸二酯键连接。第一步是将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核...
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| 最后修改于 2022-07-01 03:27:07
什么是双歧杆菌和乳酸菌菌株?
2022-06-30 03:23:38
wshphd
细菌根据其形态、培养特性和基因碱基序列的同源性进行分类。例如,双歧杆菌在分类学上属于 双歧杆菌属,可分为长(longum)和 短( breve属。乳酸菌这个名称不是分类学名称,而是发酵糖产生大量乳酸的细菌的总称 。可以提及。这些还可以进一步分类为乳酸杆菌属 中的嗜酸菌种(acidophilus species)和加氏菌种( gasseri species)等细菌种。在代表菌种的菌种中,有短双歧杆菌JCM1192T 、 加氏乳杆菌JCM1131T等“菌种” ,菌种是指从一种细菌分裂繁殖的一组细菌。属于同一菌株的不同菌株作为菌株具有共同的特征和性质,但是当检查各种性质时,每...
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| 最后修改于 2022-06-30 03:23:58
詹氏甲烷球菌详细介绍
2022-06-30 02:54:30
zhimahu
一、菌名 Methanococcus jannaschii二、分类地位 Methanococcaceae科、Methanococcus属,为一甲烷生成菌。詹纳斯(H. Jannasch)的名字,将其命名为詹氏甲烷 球菌(Methanococcus jannaschii)。三、自然栖息地 他们居住没有氧气或阳光,不需要有机碳作为能源。 1983 年发现在一个太平洋热量出气孔孔的基地。四、大小型态 细胞壁以蛋白质构成,为不规则球菌(菌越老越明显,但大小均匀),具移动性,借极端的两束鞭毛移动,鞭毛最长可达5μm、直径1.0μm。五、适合生长环境 1983 年发...
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| 最后修改于 2022-06-30 02:59:43
菌株鉴定
2022-06-30 02:52:08
wshphd
荧光定量PCR检测可以得到样本中如细菌的总的量;二代高通量测序技术,可以得到样本中如细菌的种类和相对丰度;荧光定量PCR与二代高通量技术结合起来,可以间接得到样本中不同分类水平细菌的绝对含量。
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| 最后修改于 2022-06-30 02:59:42
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