| 产品名称： | 人真皮成纤维细胞（SV40转染）（包皮，皮肤，眼睑皮都有） |
| 组织来源： | 皮肤组织 |
| 产品规格： | 5×10e5Cells/T25培养瓶 |
| 细胞简介： | 国际通用细胞系人真皮成纤维细胞HSF由美国atcc建系，但由于国内使用过于频繁因此出现了老化，目前国内已经没有现存状态优质的细胞系种子了，本公司也是发现了这个现象，因此国内建系永生化了一份人的 皮肤成纤维细胞，采用SV40T慢病毒转染建立。来源有人眼睑，手部，臀部，包皮等多份来源 |
细胞特性： | 形态：成纤维细胞样，贴壁生长。用途：仅供科研使用。 |
培养条件： | 1)准备成纤维细胞培养体系培养基； 2)培养条件：空气，100%;温度：37℃,培养箱湿度为70%-80%。 |
注意事项： | 贴壁细胞参考： 一.消毒静置等细胞稳定后拍照100X和200X。弃去培养上清，用PBS润洗细胞1-2次并吸走。 二.T25瓶加入0.25%EDTA胰蛋白酶1-2ml于培养瓶中震荡混匀，如果属于贴壁不牢固的细胞很容易脱落的 就培养箱外面消化震荡待脱落90%以上终止消化，一般小于1分钟以内，甚至不加胰酶有部分贴壁非常不牢 固的细胞也会自然震荡脱落。如果是贴壁牢固的细胞则置于37℃培养箱中消化提高效率，每40-50秒拿出培 养箱震荡帮助细胞脱落，如脱落90%以上则对应3-6ml含有10%血清的完全培养基终止彻底，以防胰酶残留损 伤细胞。如果贴壁非常牢固的细胞，脱落的比例比较低，也不超过2分钟后终止消化彻底，再加入1ml完全 培养基让细胞缓冲后再过2分钟进行二次消化，反复分步消化以降低单次消化时长，减少刺激，保护细胞膜， 或采用刮产刮细胞的方式处理也可以。总归原则是达到消化目的的同时减少细胞膜受到的损伤越小越好。 三.消化完成后轻轻吹匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。 将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶/6cm培养皿中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基 以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2和以上比例进行，具体以实际细胞密度决定。期间多 的细胞一定保存多份细胞冻存管备种。 |
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| 产品名称： | 人真皮成纤维细胞（SV40转染）（包皮，皮肤，眼睑皮都有） |
| 组织来源： | 皮肤组织 |
| 产品规格： | 5×10e5Cells/T25培养瓶 |
| 细胞简介： | 国际通用细胞系人真皮成纤维细胞HSF由美国atcc建系，但由于国内使用过于频繁因此出现了老化，目前国内已经没有现存状态优质的细胞系种子了，本公司也是发现了这个现象，因此国内建系永生化了一份人的 皮肤成纤维细胞，采用SV40T慢病毒转染建立。来源有人眼睑，手部，臀部，包皮等多份来源 |
细胞特性： | 形态：成纤维细胞样，贴壁生长。用途：仅供科研使用。 |
培养条件： | 1)准备成纤维细胞培养体系培养基； 2)培养条件：空气，100%;温度：37℃,培养箱湿度为70%-80%。 |
注意事项： | 贴壁细胞参考： 一.消毒静置等细胞稳定后拍照100X和200X。弃去培养上清，用PBS润洗细胞1-2次并吸走。 二.T25瓶加入0.25%EDTA胰蛋白酶1-2ml于培养瓶中震荡混匀，如果属于贴壁不牢固的细胞很容易脱落的 就培养箱外面消化震荡待脱落90%以上终止消化，一般小于1分钟以内，甚至不加胰酶有部分贴壁非常不牢 固的细胞也会自然震荡脱落。如果是贴壁牢固的细胞则置于37℃培养箱中消化提高效率，每40-50秒拿出培 养箱震荡帮助细胞脱落，如脱落90%以上则对应3-6ml含有10%血清的完全培养基终止彻底，以防胰酶残留损 伤细胞。如果贴壁非常牢固的细胞，脱落的比例比较低，也不超过2分钟后终止消化彻底，再加入1ml完全 培养基让细胞缓冲后再过2分钟进行二次消化，反复分步消化以降低单次消化时长，减少刺激，保护细胞膜， 或采用刮产刮细胞的方式处理也可以。总归原则是达到消化目的的同时减少细胞膜受到的损伤越小越好。 三.消化完成后轻轻吹匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。 将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶/6cm培养皿中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基 以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2和以上比例进行，具体以实际细胞密度决定。期间多 的细胞一定保存多份细胞冻存管备种。 |
