人淋巴管内皮细胞永生化-质粒载体-ATCC-DSM-CCUG-泰斯拓生物

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联系电话: 0574-87917803
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编号:TC1008701
品牌:Testobio
产品名称人淋巴管内皮细胞永生化
商品货号TC1008701
中文名称人淋巴管内皮细胞永生化
组织来源人的正常淋巴管组织 vEGFR-3免疫荧光染色为阳性
形态特征铺路石状细胞,不规则细胞
生长特性贴壁培养
特征特性淋巴管由毛细淋巴管汇合而成。其形态结构与静脉相似,但管径较细,管壁较薄。淋巴管根据其位置分为浅、深二种。 它们管位于皮下,常与浅静脉伴行,收集皮肤和皮下组织的淋巴。淋巴管在向心行程中,通常经过一个或多个淋巴结,从而把淋巴细胞带入淋巴液。淋巴系统对于维持人体内环境的稳定,引流组织间隙的体液,免疫功能的发挥具有重要的意义,这些功能的发挥与淋巴管内皮细胞的功能密切相关。同时在炎症及肿瘤过程中,淋巴管生成参与了组织的修复及肿瘤的转移。 该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
细胞污染HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养条件内皮细胞专用培养基
细胞冻存步骤待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
复苏细胞步骤将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代步骤如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。


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人淋巴管内皮细胞永生化

  • 货号: TC1008701
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产品名称人淋巴管内皮细胞永生化
商品货号TC1008701
中文名称人淋巴管内皮细胞永生化
组织来源人的正常淋巴管组织 vEGFR-3免疫荧光染色为阳性
形态特征铺路石状细胞,不规则细胞
生长特性贴壁培养
特征特性淋巴管由毛细淋巴管汇合而成。其形态结构与静脉相似,但管径较细,管壁较薄。淋巴管根据其位置分为浅、深二种。 它们管位于皮下,常与浅静脉伴行,收集皮肤和皮下组织的淋巴。淋巴管在向心行程中,通常经过一个或多个淋巴结,从而把淋巴细胞带入淋巴液。淋巴系统对于维持人体内环境的稳定,引流组织间隙的体液,免疫功能的发挥具有重要的意义,这些功能的发挥与淋巴管内皮细胞的功能密切相关。同时在炎症及肿瘤过程中,淋巴管生成参与了组织的修复及肿瘤的转移。 该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
细胞污染HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养条件内皮细胞专用培养基
细胞冻存步骤待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
复苏细胞步骤将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代步骤如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。


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